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Seguimiento de los niveles de PSA. Ejemplos no limitativos de marcadores detectables incluyen 3H, 14C, 32P y 35S, ligandos, fluoróforos, agentes quimioluminiscentes, enzimas y anticuerpos.

Otros marcadores detectables para próstata psa 1 600 estrellas uso con sondas, que pueden permitir un aumento de la sensibilidad del método de la invención, incluyen biotina y 40 radionucleótidos.

Tal y como se sabe en general, los nucleótidos radiactivos se pueden incorporar en las sondas de la invención por distintos métodos.

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En una realización, el marcador utilizado en un ensayo de detección homogéneo es un compuesto quimioluminiscente p. Los métodos 55 preferidos para marcar una sonda con un compuesto AE fijado a través de un enlazador se han descrito previamente con detalle p.

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Véase en general Kwoh y col. Ejemplos no limitativos de las técnicas de amplificación incluyen la reacción en cadena de la. USA ; Lizardi y col.

Otros ejemplos no limitativos de los métodos de amplificación se han enumerado anteriormente. Por supuesto, en algunas realizaciones, la detección directa p.

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Por lo tanto, la presente invención es adecuada para la detección a través de una de 20 estas herramientas, llamadas moléculas fluorescibles. Por lo tanto, las moléculas fluorescibles simplifican las manipulaciones que se requieren frecuentemente cuando se emplean medios de detección y de identificación tradicionales.

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De acuerdo con una realización de la presente invención, el producto amplificado se puede detectar directamente 45 con moléculas fluorescibles como cebadores para el ensayo de amplificación p. Otros cebadores de la presente invención se pueden obtener a partir de PSA.

En términos generales, su nivel de PSA debe estar muy bajo después del tratamiento. Sin embargo, los resultados del PSA no siempre son confiables, y algunas veces los médicos no saben con seguridad lo que significan.

Por supuesto, también se pueden utilizar otras variantes próstata psa 1 600 estrellas conocidas en la técnica documentos de. Se debe saber próstata psa 1 600 estrellas las secuencias y los tamaños de los cebadores descritos en las Tablas son arbitrarios y que 10 se pueden diseñar muchas secuencias distintas y emplearlas de acuerdo con la presente invención.

Aunque la presente invención se puede realizar sin el uso de una sonda que se dirija a las dianas de las secuencias de PCA3, tales como las uniones entre exones de PCA3, de acuerdo con la presente invención, tales sondas pueden añadir una especificidad adicional a los métodos y a los kits de la presente invención.

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Generalmente, un cebador en la reacción de amplificación se hibrida específicamente próstata psa 1 600 estrellas una secuencia en un primer exón o un exón secuencia arriba y el otro cebador utilizado en la reacción de amplificación se hibrida específicamente con una secuencia en un segundo exón o un exón secuencia abajoy la sonda se hibrida con una secuencia que abarca la región 3' del primer exón y la región 5' del segundo exón.

Las sondas que próstata psa 1 600 estrellas una unión exón-exón elegida pueden estar marcadas con cualquiera de los muchos 30 marcadores que pueden dar Dietas faciles resultado, de forma directa o indirecta, una señal cuando la sonda se hibrida con la secuencia amplificada que contiene la unión exón-exón.

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De igual forma, los enlaces de la 45 cadena principal de las secuencias de bases de la sonda próstata psa 1 600 estrellas incluir uno o varios enlaces de ARN, enlaces de ADN, enlaces mixtos de ARN-ADN convencionales, u otros enlaces tales como los enlaces 2'-O-metilo o enlaces peptidonucleicos, todos ellos bien conocidos por los expertos en la técnica. Las parejas de cebadores son secuencias situadas en dos exones diferentes que flanquean directa o indirectamente la unión próstata psa 1 600 estrellas elegida Tabla 4, segunda columna.

Preferiblemente, la muestra es una muestra de orina.

Cuando se emplea una muestra de orina, esta debe contener por lo menos una célula de la próstata para permitir la identificación de los marcadores específicos de la próstata p.

Se describe que un kit comprende adicionalmente en un segundo medio de recipiente, sondas o cebadores 30 oligonucleotídicos que son específicos de otro marcador específico de la próstata p.

Se describe que un kit próstata psa 1 600 estrellas adicionalmente en un segundo medio de recipiente, anticuerpos que son específicos de otro marcador específico de la próstata, con lo que se valida de este modo la presencia de células de la próstata en una muestra.

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Por supuesto, la presente invención también incluye el uso de un tercer marcador específico de la próstata. El kit también puede incluir instrucciones en relación con cada uno de los posibles diagnósticos, pronósticos, tratanósticos o uso, correlacionando una razón correspondiente entre el nivel de ARNm 55 de PCA3 y el nivel de ARNm próstata psa 1 600 estrellas PSA con un diagnóstico, un pronóstico, un tratanóstico o un uso concretos, así como la información sobre el protocolo experimental que se va a utilizar.

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También se describe que los reactivos de detección son sondas de moléculas fluorescibles que se hibridan específicamente con los productos de la amplificación. También se describe que los reactivos de detección son compuestos quimioluminiscentes tales como éster de acridinio AE.

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Tales recipientes permiten la transferencia eficaz de los reactantes desde un compartimento hasta otro compartimento, de tal modo que las muestras y los reactantes no se contaminan entre sí y los agentes o las soluciones de próstata psa 1 600 estrellas recipiente se pueden añadir de forma cuantitativa desde un compartimento a otro. Un recipiente puede contener los reactantes para amplificación y un recipiente separado contiene el reactivo para detección.

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La proteína de unión al casquete p. También se puede emplear un reactante de captura inespecífico p.

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Tales instrucciones se pueden referir a detalles relacionados con el protocolo 35 experimental, así como con los valores umbrales que se pueden utilizar. En otra realización, las células contenidas en muestras de orina de micción obtenidas después de una exploración rectal digital cuidadosa se recogieron y se lisaron en un tampón de lisis.

Los métodos de próstata psa 1 600 estrellas y de diagnóstico de la invención no requieren que se detecte la secuencia completa del 45 ARN de PCA3.

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Se ha de saber que aunque la discusión que viene a continuación se dirige específicamente a los pacientes humanos, las enseñanzas también se pueden aplicar a cualquier animal que exprese PCA3. Próstata psa 1 600 estrellas presente invención se ilustra con mayor detalle con los siguientes ejemplos no limitativos.

Los ejemplos se proporcionan sólo a modo de ilustración y no se deben interpretar como una limitación del alcance de la invención.

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Los pacientes recibieron la información del estudio y se requirió su consentimiento por escrito para entrar a formar parte del estudio. Obsérvese que en los tres casos de GS 9, parece que hay una disminución. Los pacientes recibieron la próstata psa 1 600 estrellas del estudio y se requirió su consentimiento informado firmado para poder entrar a formar parte del estudio.

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Se obtuvieron muestras procedentes de prostatectomía radical en el hospital Canisius Wilhelmina de Nijmegen y del hospital del Centro Médico Universitario de Nijmegen. A intervalos regulares, se realizó una tinción con hematoxilina y eosina para determinar el porcentaje de células normales, de BPH y de próstata psa 1 600 estrellas tumorales en los cortes del tejido.

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Se prepararon la serie de diluciones de las dianas de PCA3 y de IS-PCA3, la 50 transcripción inversa, los ensayos con PCR y de hibridación de estas cuatro curvas de calibración, y se analizaron con cuatro ensayos independientes.

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