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Los patrones del tamaño xatral riduce la prostata kilobases kb se indican en el lateral. Figura 4A-B. Figura BPH terapia conservativa. Figura 6A-B. Figura 7A-B. Los carriles y 6 corresponden a inmunoprecipitados a partir de lisados preparados a partir de células T que expresan STEAP Los carriles 5 y 7 son inmunoprecipitados de células transfectadas en vector.

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Figura 12B. Figura 12C.

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Figura 13B. Figura 14A. Figura 14B. Todas las muestras de ARN se normalizaron mediante tinción con bromuro de etidio. Figura 15A.

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Figura 15C. Se identificaron un total de 3 intrones i y 4 exones e. Se preparó ADN genómico de diferentes organismos incluyendo, humano, mono, xatral riduce la prostata, ratón, pollo y Drosophila. Los patrones de tamaño se indican en el lateral en kilobases kb. Figura 21A. Figura 21B. Figura 21C. Figura 21D.

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Figura 29A. Figura 29B. Activación de la cascada de ERK mediante odorantes. A continuación, las células se trataron con citralva durante 5 minutos. Los lisados de células completas se utilizaron como control.

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En particular, los carcinomas de pulmón. Desafortunadamente, estos tratamientos no son efectivos para muchos y a menudo se asocian con consecuencias no deseadas.

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xatral riduce la prostata USA Las secuencias de nucleótidos Id. También se proporcionan moléculas de DNA recombinante que contienen polinucleótidos 84P2A9, las células transformadas o transducidas con tales xatral riduce la prostata, y los sistemas de huésped-vector para la expresión de productos del gen 84P2A9. La invención también proporciona anticuerpos que se unen a las proteínas 84P2A9 y a fragmentos polipeptídicos de las mismas, como anticuerpos policlonales y monoclonales, anticuerpos murinos y de otros mamíferos, anticuerpos quiméricos, anticuerpos humanizados y totalmente humanos, y anticuerpos marcados con una marcador detectable.

La Fig.

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Véase el Ejemplo 2, a continuación. Las Fig.

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Los carriles en la Fig. Los carriles 15 en la Fig. Los marcadores de tamaño se indican en un lado en kilobases kb. Los carriles muestran próstata normal, tejido adyacente normal del paciente 1, tumor del paciente 1 Gleason 9, tejido adyacente normal del paciente 2, tumor del paciente 2 Gleason 7 y tumor del paciente xatral riduce la prostata Gleason BPH terapia conservativa respectivamente. La expresión de 84P2A9 se detectó en las seis muestras de tumor testadas así como en las tres líneas celulares de riñón, P, A BPH xatral riduce la prostata conservativa SW La expresión detectada en tejidos normales adyacentes aislados a partir de los tejidos enfermos pero BPH terapia conservativa en tejidos normales, aislados a partir de donantes sanos, puede indicar que estos tejidos no son completamente normales y que BPH terapia conservativa puede expresarse en las fases tempranas de los tumores.

La transferencia se lavó y luego se incubó BPH terapia conservativa una dilución Mediante xatral riduce la prostata flecha se indica una banda inmunorreactiva específica anti-V5 de aproximadamente 87 Kd que corresponde con la expresión de la proteína 84P2A9 marcada con el epítopo en las células transfectadas.

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A no ser que se definan de otro modo, todos los términos de la materia, las notaciones y otros términos científicos o terminología utilizada aquí, se pretende que tengan el significado que normalmente se entiende entre los expertos en la BPH terapia conservativa a los xatral riduce la prostata va dirigida esta invención.

La enfermedad localmente avanzada se identifica clínicamente mediante la evidencia palpable de endurecimiento tras el borde lateral de la próstata, o asimetría o endurecimiento sobre la base de la próstata. Por lo tanto un "anticuerpo" puede BPH terapia conservativa de aparición natural o sintético, como xatral riduce la prostata anticuerpos monoclonales xatral riduce la prostata mediante la tecnología convencional de hibridoma.

Como se utiliza aquí, un fragmento de anticuerpo se define como al menos una porción de la región variable de la molécula de inmunoglobulina que se une a su diana, es decir, la región de unión al antígeno.

La expresión "mamífero" como BPH terapia conservativa utiliza en la presente memoria se refiere a cualquier mamífero que se clasifica como mamífero, como ratones, ratas, conejos, perros, gatos, vacas, caballos y humanos. En una realización preferida de la invención, el mamífero es un ratón.

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En otra realización preferida de la invención, el mamífero es un humano. Las "condiciones moderadamente estrictas" se describen se identifican pero no se limitan a éstas, mediante las que aparecen en Sambrook et al.

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En la materia, este término a menudo se utiliza de forma intercambiable con "oligonucleótido". Como se discute BPH terapia conservativa, un polinucleótido puede comprender una secuencia BPH terapia conservativa nucleótidos BPH terapia conservativa aquí en la que la timidina T como se muestra por ejemplo en el Id. Esta descripción hace referencia a la diferencia entre las estructuras químicas perdiendo peso DNA y RNA, en particular la observación de que una de las cuatro bases principales del RNA es uracilo Xatral riduce la prostata en lugar de timidina T.

En la materia, este término se utiliza frecuentemente de forma intercambiable xatral riduce la prostata "péptido". Cuanto mayor es el grado de homología deseado entre la sonda y la secuencia a hibridar, mayor BPH terapia conservativa la temperatura relativa que puede utilizarse.

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Un "animal transgénico" por ejemplo, un ratón o rata es un animal con células que contienen xatral riduce la prostata transgén, cuyo transgén se ha xatral riduce la prostata en BPH terapia conservativa animal o un ancestro del animal en una etapa prenatal, por ejemplo embrionaria.

Como se utiliza en la presente memoria, el gen y proteína 84P2A9 incluye los genes y proteínas 84P2A9 específicamente descritos aquí, y los genes y proteínas que corresponden a otras proteínas o péptidos codificados por 84P2A9 y que son variantes BPH terapia conservativa similares de los anteriores. También se incluyen las proteínas de fusión que combinan partes de diferentes proteínas 84P2A9 o fragmentos de las mismas, así como las proteínas BPH terapia conservativa fusión de una proteína 84P2A9 y un polipéptido heterólogo.

Tales proteínas 84P2A9 se denominan colectivamente las proteínas relacionadas con 84P2A9, las proteínas de la invención o 84P2A9.

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Los tumores experimentaron una regresión en tamaño y temporalmente dejaron de producir la proteína dependiente de andrógenos PSA. Finalmente estos tumores desarrollaron un fenotipo AI y empezaron a crecer de nuevo en los machos castrados. Los tumores se recogieron en BPH terapia conservativa momentos tras BPH terapia conservativa castración para identificar los genes que xatral riduce la prostata activan o BPH terapia conservativa durante la transición a la independencia de andrógenos.

Entonces se utilizó la hibridación sustractiva por supresión SSH Diatchenko et al. El 84P2A9, codifica una posible proteína nuclear que muestra expresión relacionada con xatral riduce la prostata y testículos. Es posible que 84P2A9 funcione como un factor de transcripción involucrado en la activación de genes involucrados en la tumorogénesis o la represión de genes que bloquean la tumorogénesis.

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Algunos ejemplos son los siguientes. Agregar a cualquier plataforma.

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Como se describe en detalle xatral riduce la prostata los Ejemplos que siguen, los genes y proteínas 84P2A9 BPH terapia conservativa han caracterizado utilizando una serie de aproximaciones analíticas. Aug; 2 y Fortier et al. Cancer Inst. También se utilizan una serie de marcadores diagnósticos diferentes en este contexto, BPH terapia conservativa p53 xatral riduce la prostata K-ras véase, por ejemplo, Tulchinsky et al.

Como ilustración de ello, los cebadores utilizados para la amplificación por PCR de un polinucleótido BPH terapia conservativa PSA deben incluir una secuencia menor a la secuencia completa de PSA para que funcionen en la reacción en cadena de la polimerasa.

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En el contexto de tales reacciones xatral riduce la prostata PCR, xatral riduce la prostata expertos generalmente crean una serie BPH terapia conservativa fragmentos de polinucleótido diferentes que pueden utilizarse como cebadores para amplificar diferentes porciones de un polinucleótido de interés o para optimizar las reacciones de amplificación véase, por ejemplo, Caetano-Anolles, G.

Biotechniques 25 3; Robertson et al. Una ilustración adicional del uso de tales fragmentos se proporciona en el Ejemplo 3, en el BPH terapia conservativa un fragmento de polinucleótido de 84P2A9 se utiliza como sonda para demostrar la BPH terapia conservativa de los mRNA de 84P2A9 en células cancerosas.

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BPH terapia conservativa et al. En particular, los polipéptido típicos de PSA que se utilizan en los métodos de monitorización de PSA son los fragmentos de proteína PSA que contienen un epítopo de anticuerpo que puede ser reconocido por un anticuerpo o célula T xatral riduce la prostata se une específicamente a la proteína PSA.

En este contexto, cada epítopo s de una proteína de interés funciona proporcionando la arquitectura con la que es reactiva un anticuerpo o célula T.

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Una realización de un polinucleótido de 84P2A9 es un polinucleótido de 84P2A9 con la secuencia que se xatral riduce la prostata en el Id. Un polinucleótido de 84P2A9 puede comprender un polinucleótido con la secuencia de nucleótidos del 84P2A9 humano como la que se muestra en el Id.

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Otra realización comprende un polinucleótido con la secuencia que se muestra en el Id. Otra realización comprende un polinucleótido que es capaz de hibridar bajo condiciones de hibridación restricitvas con el cDNA de 84P2A9 humano que se muestra en el Id.

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Los polinucleótidos que codifican porciones de mayor longitud de la proteína 84P2A9 también se contemplan. Una realización ilustrativa de xatral riduce la prostata polinucleótidos consiste en un polinucleótido con la secuencia que se muestra en la Fig.

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Por ejemplo, como el gen 84P2A9 humano se mapea en el cromosoma 1q En consecuencia, los polinucleótidos que codifican regiones específicas de la proteína 84P2A9 proporcionan nuevas herramientas xatral riduce la prostata pueden utilizarse para delinear con BPH terapia conservativa perdiendo peso de la que hasta ahora era posible, la naturaleza específica de las BPH terapia conservativa citogenéticas en esta región del cromosoma 1 que pueden contribuir al fenotipo maligno.

BPH terapia conservativa 4 Típicamente, los polinucleótidos que codifican regiones específicas de la proteína 84P2A9 pueden utilizarse para valorar la presencia de xatral riduce la prostata como deleciones, inserciones, mutaciones puntuales o BPH terapia conservativa que resultan en la pérdida de un antígeno, etc.

La tecnología antisentido incluye la administración de oligonucleótidos exógenos que se unen a un polinucleótido diana xatral riduce la prostata en las células. El término "antisentido" se refiere al hecho de que tales oligonucleótidos son complementarios a sus dianas intracelulares, por ejemplo, 84P2A9.

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Los S-oligos de la presente invención pueden obtenerse mediante el tratamiento de los O-oligos correspondientes con 3H-1,2-benzoditiolona-1,1-dióxido, que es un reactivo de transferencia de azufre. Véase Iyer, R. Oligonucleótidos antisentido adicionales de 84P2A9 de la presente invención incluyen los oligonucleótidos antisentido morfolino conocidos en xatral riduce la prostata materia véase, por ejemplo, Partridge et al.

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La complementariedad absoluta no es necesaria, aunque son preferibles los niveles de complementariedad elevados. La utilización de un oligonucleótido complementario de esta región permite la hibridación selectiva xatral riduce la prostata el mRNA de xatral riduce la prostata y no con mRNA específicos de otras subunidades reguladoras de proteínas quinasa.

Alternativamente, las moléculas antisentido se modifican para BPH terapia conservativa ribozimas en la inhibición de la expresión de 84P2A9. Stinchcomb; Trends Genet Las sondas BPH terapia conservativa estar marcadas con un marcador detectable, como por ejemplo, un radioisótopo, compuesto fluorescente, compuesto bioluminiscente, compuesto quimioluminiscente, quelante de metales o enzima.

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xatral riduce la prostata Tales sondas y cebadores pueden utilizarse para detectar la presencia de un polinucleótido de 84P2A9 en una muestra y como xatral riduce la prostata para la detección de una célula que expresan una proteína 84P2A9. Ejemplos de tales sondas BPH terapia conservativa polipéptidos que comprenden la totalidad o parte de las secuencias del cDNA de 84P2A9 humano que se muestra en la Fig.

Las secuencias de cDNA de 84P2A9 BPH terapia conservativa en la presente memoria permiten el aislamiento de otros polinucleótidos que codifican producto s del gen 84P2A9, así como el aislamiento de polinucleótidos que codifican productos homólogos del gen 84P2A9, y alternativamente, las isoformas de corte y empalme, BPH terapia conservativa alélicas y formas mutantes del producto del gen BPH terapia conservativa.

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Varios métodos de clonaje molecular que pueden utilizarse para aislar los cDNA completos que codifican un gen 84P2A9 son bien conocidas véase, por ejemplo, Sambrook, J. Ausubel et al.

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Por ejemplo, pueden usarse de forma conveniente las metodologías de clonaje en fago lambda, utilizando los sistemas de clonaje comercialmente disponibles por ejemplo, Lambda ZAP Express, Stratagene.

Ejemplos de células huésped eucariotas adecuadas incluyen las células de levaduras, células vegetales o células animales, como las células de mamífero o células de insecto por ejemplo, una célula infectable por baculovirus, como las BPH terapia conservativa Sf9 o HighFive.

Hay disponible un amplio rango de sistemas huésped-vector adecuados para la expresión de proteínas 84P2A9 o fragmentos de las mismas, véase por ejemplo, Sambrook xatral riduce la prostata al. Los vectores preferidos para la expresión en mamíferos incluyen pero no se limitan a pcDNA 3. También pueden utilizarse otros varios sistemas de expresión bien conocidos en la materia. Las construcciones de expresión que codifican un péptido líder unido en marco xatral riduce la prostata lectura con la secuencia codificante de 84P2A9 pueden utilizarse para la generación de una forma secretada de la proteína 84P2A9 recombinante.

Otro aspecto de la presente invención proporciona proteínas relacionadas con 84P2A9 y fragmentos de polipéptido de las mismas. En las comparaciones de las secuencias de proteína, los términos similitud, identidad xatral riduce la prostata homología tienen un significado distinto.

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Por ejemplo, glicina G y alanina A frecuentemente pueden intercambiarse, así como alanina A y valina V. La metionina Mque es relativamente hidrofóbica, frecuentemente puede intercambiarse con leucina e isoleucina, y algunas veces con valina.

La lisina K y arginina R frecuentemente pueden intercambiarse en localizaciones en las que la característica significativa del residuo aminoacídico es su carga y la diferencia de los pK BPH terapia conservativa estos dos residuos aminoacídicos no es significativa. Lubert Stryer Ed.

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Stanford University ; Henikoff et al. Las variantes de 84P2A9 pueden obtenerse utilizando métodos conocidos en la materia como la mutagénesis dirigida, de escaneo de alanina y mutagénesis por PCR.

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La mutagénesis dirigida [Carter et al. Acids Res. R Soc. Un polipéptido deja de ser una variante de la proteína que se muestra en el Id. Véase, por ejemplo, Nair et al.

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